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高速逆流色譜儀配液分液步驟

發布時間:2016-02-01   點擊次數:1619次
 高速逆流色譜的操作
 
配液
選擇好一定比例的各種溶劑,量取特定體積,加入到干凈分液漏斗中,搖勻(搖勻過程中注意放氣),靜置10min左右。
如我們配制正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水(1:1:1:1,v/v)的液體約200mL,分別量取50mL正己烷,乙酸乙酯,甲醇,水加入分液漏斗搖勻,靜置即可。
分液
將分層好的上下兩相分別盛入兩個干凈的試劑瓶中。
脫氣
將分別盛有上下兩相的液體的試劑瓶放入超聲脫氣機中,脫氣20min。這一步主要是為了防止在高速逆流色譜儀工作的過程中產生氣泡。
平衡
首先開啟水浴保證溫度,然后將固定相以一定流速泵入色譜儀中,待到出液口有液體流出即可。使機器運轉,再以一定流速泵入流動相。當出液口有流動相流出時,即達到平衡。
進樣
停泵,將六通閥旋轉到load端,用注射器(哈哈,不是進樣器,普通注射器即可)將六通閥內空氣吹盡,抽取樣品(樣品用流動相或固定相溶解),樣品充滿整個進樣圈即可。然后將六通閥旋轉到inject端,開泵,同時檢測器開始記錄。
收集
按要求收集餾分即可。
后處理
一般采用旋轉蒸發儀蒸干即可。
逆流色譜的應用
逆流色譜的應用主要有天然植物有效成分分離,海洋生物活性成分的分離,抗生素分離,蛋白質分離等等。
 

浙公網安備 33010502001776號

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